熒光定量PCR簡介及原理

熒光定量PCR簡介

熒光定量PCR檢測技術誕生至今已10多年的時間，而其應用一直都沒廣泛展開，究其原因，無外乎受制于相關儀器、試劑和技術的發展

。近期，尤其是08年以來，儀器和試劑是遍地開花，這也使科研人員均躍躍欲試，都想借此技術使自己的研究能突飛猛進，

發展勢頭通過查找每年所發表的文章數可一目了然。據有關統計，在 Medline 數據庫中，用“Taqman" 或 "real time PCR"

作為關鍵詞檢索，1996 年是19 篇，1999 年157 篇，到2003 年就高達2984 篇，2009年會是多少呢？我們不得而知

但其迅猛的發展勢頭卻是不可更改的，本公司真誠希望能和眾多研究人員共同努力，抓住這一大好時機，為科研事業的發展貢獻自身的

力量?；谶@一目標，本公司長期以來對熒光定量PCR，無論是技術還是多年來的產品，均進行了深入地研究，

并及時推出更加優異的熒光定量 PCR技術服務。

熒光定量PCR原理

熒光定量PCR最早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量

技術。該技術是在常規PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現其定量功能的。其原理：隨著PCR反應的進行，

PCR反應產物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經過一個循環，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化

監測產物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。

一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，

擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產物量的變化。而在平臺期，擴增產物已不再呈指數級的增加，

PCR 的終產物量與起始模板量之間沒有線性關系，根據最終的 PCR 產物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數。

只有在熒光信號指數擴增階段， PCR產物量的對數值與起始模板量之間存在線性關系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。

為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值

上海雅吉生物是一家生物企業主營ATCC細胞，細胞系，原代細胞和培養試劑，重組蛋白，ELISA試劑盒、抗體、熒光定量PCR檢測試劑盒