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        elisa試劑盒樣本處理及要求

        更新時間:2024-06-11      點擊次數:810

        elisa試劑盒樣本處理及要求

         

        ELISA的樣本實驗準備


        在收集樣本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天就進行


        檢測的樣本,及時儲存在4℃備用。對于隔天再檢測的樣本,及時分裝后凍存在-20℃備用,有條件的,最好-70℃凍存備用。標本應避免

        反復凍融。


            液體類標本:  包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。

        1.  血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或將上清置于-20℃或-80℃

        保存,但應避免反復凍融。

        2.  血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于

        -20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

        3.  組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。

        將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,

        并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎

        ,或反復凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。


        4.  細胞培養物上清或其它生物標本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。


        注:標本溶血會影響最后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測


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