Exonuclease VII試劑

Exonuclease VII試劑來源于大腸桿菌，從 5' -3' 和 3'-5'方向切割單鏈 DNA，對線性或環狀雙鏈 DNA 沒有活性。

當 PCR 完成時，可以使用核酸外切酶 VII 去除寡核苷酸引物，然后再使用不同的引物進行下一步 PCR

。核酸外切酶 VII 消化單鏈 DNA 時，無需金屬離子。 本產品是通過重組表達核酸外切酶 VII 基因（XseA 和 XseB）

而得高純度蛋白。

組分

名稱數量

Exonuclease VII (10 U/μl)25 μl/250 μl

10X Exonuclease VII Buffer1 ml/1 mlx5

單位定義

在 50 μl 反應體系中，37℃ 條件下，30分 鐘內能催化產生 1 nmol 酸溶性核苷酸所需的酶量定義 為一個活性單位。

應用

PCR后去除多余引物

PCR后去除硫代磷酸化寡核苷酸引物

去除雙鏈DNA中的單鏈DNA

1X Exonuclease VII Buffer

50 mM Tris-HCl (pH 8), 50 mM Na3PO4, 8 mM EDTA , 10 mM 2-mercaptoethanol。

熱失活

95℃ 10min

酶保存液

50 mM Tris-HCl (pH 8.0), 0.1M NaCl, 1 mM DTT, 50% Glycerol.

儲存

置于-20°C，可保存2年。

Exonuclease VII試劑恒溫擴增使用策略及實例展示

應用實例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物組進行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標準定量PCR儀或恒溫熒光儀上進行反應。以體外轉錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應25min的檢測結果，可以看到檢測反應<20min(達平臺期)。

應用實例2： 用 LP1002引物組進行的LAMP測試。OG變色法為終點變色策略，在反應結束后，倒置反應管，溶解管蓋上染料后，陽性樣本呈現出醒目的綠色，陰性表現出橙色，區分明顯。且該方法不受樣本類型限制，雜質耐受性很好。以體外轉錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應20min后檢測結果。

應用實例3：A3825-01 紅黃變色反應（肉眼觀察）

以 體外轉錄 RNA 為模板，1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結束反應起

始前，下圖為 65 度反應 30min 后。

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