T7 SSB單鏈結(jié)合蛋白試劑

T7 SSB單鏈結(jié)合蛋白試劑（T7 single strand binding protein）來源于T7噬菌體基因2.5，又名T7 gp2.5， 參與T7噬菌體DNA的

復(fù)制和重組修復(fù)。該蛋白可與單鏈DNA模板結(jié)合，與T7 DNA 聚合酶和解旋酶/引發(fā)酶相互作用，可通過滾環(huán)擴(kuò)增的方式獲得長

達(dá)40kb的DNA。該制品是通過基因工程方式重組表達(dá)純化而得。

組分

組分名稱600 μg

T7 SSB Protein (3 μg/μl)200 μl

應(yīng)用

提高 DNA 聚合酶的延伸能力

穩(wěn)定和標(biāo)記 ssDNA 結(jié)構(gòu)

增加 PCR 反應(yīng)的產(chǎn)量和特異性

增加 RT-PCR 中，反轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)量和延伸能力

改善強(qiáng)二級結(jié)構(gòu)區(qū)域的 DNA 測序

儲存

-20℃可保存3年。

蛋白保存液

20mM Tris-HCl，pH7.5

200mM NaCl

5mM DTT

25%甘油

T7 SSB單鏈結(jié)合蛋白試劑恒溫?cái)U(kuò)增使用策略及實(shí)例展示

應(yīng)用實(shí)例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標(biāo)準(zhǔn)定量PCR儀或恒溫?zé)晒鈨x上進(jìn)行反應(yīng)。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)25min的檢測結(jié)果，可以看到檢測反應(yīng)<20min(達(dá)平臺期)。

應(yīng)用實(shí)例2： 用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測試。OG變色法為終點(diǎn)變色策略，在反應(yīng)結(jié)束后，倒置反應(yīng)管，溶解管蓋上染料后，陽性樣本呈現(xiàn)出醒目的綠色，陰性表現(xiàn)出橙色，區(qū)分明顯。且該方法不受樣本類型限制，雜質(zhì)耐受性很好。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)20min后檢測結(jié)果。

應(yīng)用實(shí)例3：A3825-01 紅黃變色反應(yīng)（肉眼觀察）

以 體外轉(zhuǎn)錄 RNA 為模板，1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結(jié)束反應(yīng)起

始前，下圖為 65 度反應(yīng) 30min 后。

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