動物細胞原代培養(yǎng)的方法有哪些動物細胞原代培養(yǎng)是直接從活體組織中分離細胞并進行shou次培養(yǎng)的技術(shù)，其核心是將組織塊分散為單細胞或小細胞團，再模擬體內(nèi)環(huán)境促進細胞生長。根據(jù)組織分散方式的不同，常用方法主要有以下4類：一、酶消化法（常用）利用蛋...

熒光定量PCR（qPCR）是一種通過實時監(jiān)測PCR擴增過程中熒光信號變化，實現(xiàn)核酸定量分析的分子生物學(xué)技術(shù)。其核心原理、熒光標記體系及Ct值解讀，構(gòu)成了該技術(shù)的三大支柱。一、核心原理：實時監(jiān)測與定量分析qPCR在傳統(tǒng)PCR基礎(chǔ)上引入熒光標記...

pShuttle-CMV-N-Myc自行用于在哺乳動物細胞中表達N端Myctag(Myc標簽)融合蛋白的重組腺病毒包裝用的穿梭質(zhì)粒。本穿梭質(zhì)粒構(gòu)建后，需要和預(yù)轉(zhuǎn)染了pAdEasy-1質(zhì)粒的BJ5183菌株(8107)以及重組腺病毒包裝細胞配...

在細胞生物學(xué)的研究領(lǐng)域，尤其是在肝臟相關(guān)的生理和病理學(xué)研究中，小鼠肝細胞AML12已經(jīng)成為一種廣泛應(yīng)用的模型系統(tǒng)。這些細胞不僅為我們揭示了肝臟的基本功能，還幫助科學(xué)家們更好地理解肝臟疾病的機制，為新藥的研發(fā)和治療方法的優(yōu)化提供了重要的實驗平...

耐藥細胞雖對特定藥物不敏感，但可能因代謝壓力、基因表達異常（如抗凋亡基因過表達伴隨其他應(yīng)激通路激活），對其他刺激（如營養(yǎng)缺乏、機械損傷、氧化應(yīng)激）更易發(fā)生凋亡。長期培養(yǎng)中，細胞易因“隱性應(yīng)激”積累而逐漸失活（狀態(tài)變差、貼壁能力下降）。部分耐...

在現(xiàn)代生命科學(xué)研究中，基因敲除（Knockout,KO）細胞株已經(jīng)成為探索基因功能、驗證藥物靶點、模擬疾病機制的核心工具。依托CRISPR/Cas9技術(shù)，科研人員可以對特定基因進行精準、yonjiu性失活，極大提升了實驗效率和可靠性。但要獲...

如何預(yù)防細胞污染？體外培養(yǎng)的細胞受到嚴重污染時，有時即使想盡各種辦法也難以挽回。因此，防止污染，預(yù)防是關(guān)鍵。只有將預(yù)防措施貫穿于整個細胞培養(yǎng)的始終，才能將發(fā)生污染的可能性降到最小程度。如何預(yù)防細胞污染？一般預(yù)防可從以下幾方面著手：1、從物品...

相信很多人一聽到引物二聚體的時候都會很憤怒，因為幾乎我們每個人都受到過它的折磨。它作為PCR的副產(chǎn)物，甚至有時候是主要產(chǎn)物充斥著我們的整個PCR實驗過程。你在被它折磨的不行不行的時候，你有想過它為什么總是出現(xiàn)在你的實驗結(jié)果中嗎接下來就讓我?guī)?..

實驗方法原理細胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融，實驗證明這樣可以最大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質(zhì)能提高細胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外，減少細胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少由...